很多(duō)用戶(hù)認(rèn)為(wéi)液(yè)氮(dàn)罐(guàn)內部處於-196℃超低(dī)溫，細菌無(wú)法存(cún)活(huó)，因(yīn)此從(cóng)不(bù)清洗。然(rán)而，當發(fā)生(shēng)凍存(cún)管破裂(liè)，樣(yàng)本泄漏(lòu)或(huò)長(cháng)期使用(yòng)後，罐內可能積(jī)累有(yǒu)機(jī)物(wù)殘留，黴(méi)菌(jūn)孢子(zǐ)甚至病(bìng)原體。這些汙染(rǎn)物(wù)在補充液氮或(huò)取放樣本時可(kě)能造成交叉(chā)汙染。那麼，液氮(dàn)罐到(dào)底(dǐ)要不(bù)要清洗？如何安(ān)全(quán)操作(zuò)？

一，什麼情(qíng)況(kuàng)下必(bì)須(xū)清(qīng)洗液(yè)氮(dàn)罐？

• 明顯汙染(rǎn)：發(fā)現罐底(dǐ)有異物，顏色(sè)異(yì)常或有(yǒu)異(yì)味（如培養基(jī)泄漏後(hòu)的(dí)焦(jiāo)糖(táng)味）。

• 交叉(chā)汙(wū)染事(shì)件(jiàn)：確認或懷疑某批樣本(běn)帶有病(bìng)原(yuán)體（如(rú)支(zhī)原體，乙肝(gān)病(bìng)毒）泄漏(lòu)。

• 更換保(bǎo)存(cún)物(wù)種(zhǒng)：從(cóng)保(bǎo)存動(dòng)物(wù)細胞改(gǎi)為人類(lèi)細(xì)胞(bāo)或(huò)微生(shēng)物，建議徹(chè)底消毒。

• 長(cháng)期未用(yòng)重啟：閒置(zhì)超過6個月且未蓋(gài)頸(jǐng)塞(sāi)，內部(bù)可能(néng)積塵(chén)或(huò)滋生(shēng)黴菌。

• 定(dìng)期(qī)預(yù)防(fáng)性(xìng)清洗：建議(yì)每2~3年一(yī)次（生(shēng)物樣本庫標(biāo)準(zhǔn)更高(gāo)，可每(měi)年(nián)一(yī)次(cì)）。

二，清(qīng)潔(jié)與消毒(dú)操作流程（分步詳(xiáng)解(jiě)）

準(zhǔn)備工(gōng)作

• 將罐內所有(yǒu)殘餘液(yè)氮(dàn)排(pái)空（靜置(zhì)自(zì)然(rán)揮發或轉(zhuǎn)移至其他罐）。

• 穿戴防凍(dòng)手套(tào)，麵(miàn)罩(zhào)，防(fáng)水圍裙。

• 準備工具：長柄(bǐng)軟毛(máo)刷(shuā)（尼龍(lóng)材質），無磷(lín)中(zhōng)性清洗劑，純(chún)水或蒸(zhēng)餾水(shuǐ)，75%酒(jiǔ)精(jīng)或0.2%過氧乙(yǐ)酸（消(xiāo)毒用），吸水毛巾(jīn)。

步驟1：升(shēng)溫與幹燥
將(jiāng)空(kōng)罐(guàn)移(yí)至室溫(wēn)環境，打開頸(jǐng)塞，放置24~48小時，讓罐(guàn)內溫度自然回升至接近室溫。切(qiē)勿用(yòng)熱水(shuǐ)或(huò)火(huǒ)焰加熱。

步驟2：機(jī)械清洗(xǐ)

• 用(yòng)長柄軟(ruǎn)毛刷蘸(zhàn)取(qǔ)稀釋的中(zhōng)性清(qīng)洗劑（按(àn)說明書比(bǐ)例(lì)，通(tōng)常1:100），刷洗(xǐ)罐(guàn)體內壁(bì)，頸管(guǎn)內(nèi)壁(bì)及(jí)底部。重點(diǎn)刷洗死角(jiǎo)。

• 禁止(zhǐ)使用鋼(gāng)絲(sī)球，金屬刷(shuā)或含(hán)氯(lǜ)消(xiāo)毒劑(jì)（氯離子(zǐ)會腐蝕(shí)不(bù)鏽(xiù)鋼內(nèi)膽）。

步(bù)驟(zhòu)3：衝(chōng)洗
用大量純(chún)水(shuǐ)或(huò)蒸(zhēng)餾水(shuǐ)反復衝(chōng)洗內壁，直至衝洗水(shuǐ)清澈(chè)無泡沫(mò)。至(zhì)少衝(chōng)洗(xǐ)3遍。後(hòu)一遍(biàn)可用少量(liáng)純(chún)水浸泡10分(fēn)鐘後倒(dǎo)出(chū)。

步(bù)驟(zhòu)4：消毒（僅(jǐn)當(dāng)有(yǒu)汙染風(fēng)險(xiǎn)時）

• 方法A（推薦）：用75%酒(jiǔ)精(jīng)噴(pēn)灑或擦拭內(nèi)壁，作(zuò)用(yòng)5分(fēn)鐘後，用純水衝(chōng)洗(xǐ)2遍。

• 方法B（針(zhēn)對頑(wán)固病(bìng)原體）：用(yòng)0.2%過氧乙(yǐ)酸(suān)溶液(yè)浸(jìn)泡內壁15分(fēn)鐘(zhōng)，再(zài)徹(chè)底衝洗(xǐ)幹(gān)淨(jìng)。

• 注(zhù)意(yì)：消毒後必(bì)須(xū)徹底(dǐ)去(qù)除殘(cán)留消(xiāo)毒劑，否則可能腐(fǔ)蝕(shí)內膽。

步驟(zhòu)5：幹燥
將罐體倒置或(huò)傾(qīng)斜，在(zài)通(tōng)風幹燥處自(zì)然晾(liàng)幹24小(xiǎo)時(shí)以(yǐ)上(shàng)。也(yě)可用(yòng)幹燥(zào)的(dí)氮(dàn)氣(qì)吹(chuī)掃頸管內壁(bì)。確認內(nèi)部完(wán)全幹(gān)燥(zào)後(hòu)，方可重(zhòng)新使(shǐ)用(yòng)。

三(sān)，禁止事項與常見(jiàn)誤區

四(sì)，預(yù)防汙(wū)染的(dí)實踐(jiàn)

• 使用密封(fēng)凍(dòng)存(cún)盒：每個樣(yàng)本(běn)管(guǎn)外再加(jiā)一層(céng)熱縮(suō)膜或(huò)密(mì)封(fēng)袋。

• 分(fēn)區管(guǎn)理：不同課(kè)題組(zǔ)，不(bù)同(tóng)風險(xiǎn)等樣本(běn)使用(yòng)不(bù)同提籃(lán)或(huò)不(bù)同(tóng)罐體。

• 定(dìng)期抽檢：每(měi)半年取(qǔ)罐(guàn)內冷(lěng)凝水做微生(shēng)物(wù)培(péi)養。

液氮罐(guàn)不(bù)需要(yào)頻(pín)繁(fán)清(qīng)洗，但在汙染事件或定期(qī)維護(hù)時必須正確(què)操作(zuò)。核(hé)心(xīn)要(yào)點：中(zhōng)性清(qīng)洗(xǐ)劑，純水衝洗(xǐ)，徹底(dǐ)幹燥，禁用熱水(shuǐ)。